世界首例手工克隆绵羊诞生已逾两个月，各项指标稳定

　　图为鹏鹏和它的代孕母羊。 刘鹏 摄

目前世界上首例采用手工克隆技术获得的转基因克隆绵羊，诞生至今已逾两个月。目前，其体重已达17.28公斤，健康状况良好。而且最近的取样分析发现，转入其细胞内的“ω—3脂肪酸去饱和酶基因fat—1”已经表达。

“这表明此次手工克隆羊工程取得了初步成功。下一步，我们还会对手工克隆羊的生长发育进行跟踪研究，后续过程还有很多难题有待突破。”深圳华大基因研究院副总裁、华大方舟公司总经理杜玉涛不敢轻言乐观。

这项技术突破，是由深圳华大基因研究院与中科院遗传发育所、石河子大学生命科学学院联合开展的。到底什么是手工克隆技术？它与我们常讲的克隆有何不同？手工克隆羊的诞生，在科技创新上有哪些意义？日前，记者采访了深圳华大基因有关研究人员，一一寻求这些问题的答案。

有何不同？

跟常规克隆相比，手工克隆最大的不同是在第二个步骤——重构胚胎

杜玉涛介绍，手工克隆最早于2001年出现，也不是最新的技术，但之前只是用在克隆牛、猪上，克隆羊的成功，还是首次。

“跟常规克隆相比，手工克隆最大的不同是在第二个步骤——重构胚胎。”华大基因转基因手工克隆羊项目负责人刘鹏介绍，在动物卵母细胞的外围，有一层坚韧的透明带，像“蛋壳”一样包裹着卵母细胞。要给它换“蛋黄”，就必须先把这层“蛋壳”解决掉。这也是克隆过程中的关键环节。

到底什么是手工克隆，这要从手工克隆羊诞生的过程说起。

3月26日12时16分，第一头转基因克隆羊成功诞生，初生体重5.74公斤，取名鹏鹏。目前，它各项生命体征正常。

鹏鹏来源于一项名为“农业部绵羊转基因新品种培育重大专项”的863课题。“2009年9月，当时课题还没申请下来，我们预先开展先期准备，从新疆一只‘中国美利奴’品种的健壮种公羊的耳朵上取了一块组织带回深圳，建立转基因细胞系。”杜玉涛说。

刘鹏介绍，所谓建转基因细胞系，是指在获取的公羊体细胞中插入“ω—3脂肪酸去饱和酶基因fat—1”，经过一段时间的增殖，筛选出显示该基因阳性（也就是基因已经成功插入）的细胞，再行增殖，形成一定数量的转基因细胞。

之后，就是手工克隆的关键步骤：2010年10月，项目获批3个月后，研究人员将这批细胞带到新疆，开始手工克隆实验。首先获取母羊的一些卵母细胞，抽去细胞核，只留下细胞质。就像“取出鸡蛋的蛋黄”那样，把承载遗传信息的细胞核清除掉。再将之前获得的转基因细胞融入进去，犹如植入一颗新的“蛋黄”，使之融为一体。

这颗全新的“鸡蛋”虽然来自两个不同的个体，但它只有一套遗传基因，全部来自同一只羊。新生的细胞在电击激活和化学激活后开始以2的N次方速度分裂发育，经过6—7 天后，形成一个囊胚。“这个步骤叫重构胚胎的激活和体外培养，最后得到的囊胚，肉眼下只是小小的一点，放在显微镜强光下勉强可以看见。”刘鹏说。

最后一个步骤是孕产：重构胚胎发育到囊胚后，2011年10月底到11月初，研究人员将其移植到代孕母羊子宫内，经过5个月的怀孕期，鹏鹏诞生。